كتب physical mapping
اذا لم تجد ما تبحث عنه يمكنك استخدام كلمات أكثر دقة.
رسم الخرائط الفيزيائية (معلومة)
تتضمن تقنيات الخرائط الفيزيائية المستخدمة لإنشاء خريطة جينية ما يلي :رسم الخرائط التقييدية، التهجين الفلوري في الموقع ( FISH), ورسم خرائط الموقع المتسلسل (STS).
رسم الخرائط التقييدية
رسم الخرائط التقييدية هو الطريقة التي يتم الحصول من خلالها على المعلومات الهيكلية المتعلقة بشريحة من الحمض النووي باستخدام إنزيمات التقييد. إن الإنزيمات المقيدة هي إنزيمات تساعد على قطع أجزاء من الحمض النووي في تسلسلات التعرف المحددة. أساس رسم الخرائط ينطوي على هضم (أو قطع) الحمض النووي مع انزيمات التقييد. ثم يتم تشغيل شظايا الحمض النووي المهضومة على هلام agarose باستخدام الجل الكهربائي، والتي توفر المعلومات المتعلقة بحجم هذه الأجزاء المهضومة. تساعد هذه الأحجام على الإشارة إلى المسافة بين مواقع إنزيم التقييد على الحمض النووي المحلّل، وتزوّد الباحثين بالمعلومات المتعلقة بهيكل الحمض النووي المحلّل.
موقع التهجين الفلوري (FISH)
FISH هي طريقة تستخدم للكشف عن وجود (أو غياب ) تسلسل DNA داخل الخلية. يتم وصف مجسات الحمض النووي التي هي محددة بالنسبة للأقاليم الصبغية أو الجينات ذات الأهمية مع fluorochromes. من خلال ربط fluorochromes إلى مجسات، يمكن للباحثين تصور العديد من تسلسلات الحمض النووي في وقت واحد. فعندما يتلامس المجس مع الحمض النووي على كروموسوم معين، سيحدث التهجين. وبالتالي، سيتم الحصول على المعلومات المتعلقة بموقع هذا التسلسل من الحمض النووي. يقوم FISH بتحليل الحمض النووي المنفصل ( ssDNA ). وبمجرد أن يكون الحمض النووي في حالته الوحيدة المحصورة، يمكن أن يرتبط الحمض النووي بمسباره المحدد. [2]
خريطة الموقع المتسلسل (STS)
الموقع المتسلسل الموسوم (STS) هو عبارة عن تسلسل قصير من الحمض النووي (حوالي 100 - 500 زوج قاعدي في الطول) من الملاحظ أنه يظهر عدة مرات في جينوم الفرد. هذه المواقع يمكن التعرف عليها بسهولة، وعادة ما تظهر مرة واحدة على الأقل في الحمض النووي الذي يجري تحليله. عادة ما تحتوي هذه المواقع على تعدد أشكال جيني مما يجعلها مصادر للعلامات الجينية القابلة للحياة (لأنها تختلف عن غيرها من التسلسلات). يمكن تعيين المواقع ذات العلامات المتسلسلة داخل جينومنا وتتطلب مجموعة من أجزاء DNA المتداخلة. يستخدم تفاعل البوليميراز المتسلسل عادة لإنتاج مجموعة من شظايا الحمض النووي. بعد إنشاء الأجزاء المتداخلة، يمكن تحليل مسافة الخريطة بين STS. من أجل حساب مسافة الخريطة بين STSs ، يحدد الباحثون التردد الذي يحدث عنده انقطاعات بين العلامتين (انظر التسلسل الرمزي) [3]
