كتب assembly and purification
اذا لم تجد ما تبحث عنه يمكنك استخدام كلمات أكثر دقة.
التجميع والتنقية (معلومة)
الحمض النووي الدوراني الحر عرضة للتلوث الإشعاعي وذلك بسبب الخلايا المتمزقة أثناء عملية التنقية. وبسبب ذلك قد تؤدي وسائل التنقية المختلفة إلى نتائج مختلفة بشكل ملحوظ في استخلاص الحمض النووي الدوراني الحر. لحد الآن، وسائل التنقية المختلفة تتضمن جمع الدم عبر البزل الوريدي ثم إجراء الطرد المركزي لتكوير الخلايا واستخلاص الحمض النووي الدوراني الحر من البلازما.
والوسيلة النوعية لاستخلاص هذا الحمض النووي من البلازما تعتمد على البروتوكول المطلوب:
- تحليل الحمض النووي الدوراني الحر في البلازما
- تفاعل البوليمراز المتسلسل أو PCR
بالعادة، يتم الكشف عن تسلسل الشريط المورثي في الحمض النووي الدوراني الحر بطريقتين، الكشف النوعي المتسلسل بناءً على تفاعل البوليمزار المتسلسل والتحليل الوراثي العام لكامل الحمض النووي الدوراني الحر الموجود في الدم(سَلْسَلة الحمض النووي). يشخص في الأساس وجود الحمض النووي الدوراني الحر الحاوي على الحمض النووي الخاص بالخلايا السرطانية باستخدام تضخيم تفاعل البوليمراز المتسلسل للمورثات الطافرة من الحمض النووي الدوراني الحر المستخلص من البلازما.
التحليل المعتمد على تفاعل البوليميراز المستلسل لهذا الحمض يكون بناءً على الحالة التحليلية التي تم اجراء التحليل بها إما تفاعل البوليمراز المتسلسل الرقمي أو اللحظي. كلتا التقنيتان يمكنهما اكتشاف جزيء واحد مستهدف في عينة ما لهذا السبب فإن وسيلة الكشف المعتمدة على تفاعل البوليمراز المتسلسل لاتزال أداة مهمة في تحديد وجود الحمض النووي الدوراني الحر. إلا أن هذه الوسيلة لا تملك القدرة على اكتشاف أكبر تباين هيكلي لهذا الحمض ولذلك نستخدم تسلسل الجيل الموازي التالي منه أكثر لتحديد محتوى الحمض الحمض النووي السرطاني الدورراني ضمن الحمض النووي الدوراني الحر.
